潔凈手術(shù)室作為醫(yī)院感染防控的關(guān)鍵環(huán)節(jié),其空氣微生物濃度的穩(wěn)定性直接關(guān)系手術(shù)安全與患者預(yù)后。然而,在實際運行中,因運維管理疏漏、人員操作不規(guī)范及凈化空調(diào)系統(tǒng)長期運行導(dǎo)致的過濾器性能衰減等問題,可能引發(fā)潔凈度參數(shù)偏離設(shè)計標(biāo)準(zhǔn),增加術(shù)后感染風(fēng)險。因此,定期開展浮游菌監(jiān)測是維持潔凈環(huán)境的核心措施之一。
我們推薦使用環(huán)凱牌浮游微生物采樣器(HKM-IIIB)對手術(shù)室進(jìn)行采樣,HKM-IIIB型浮游微生物采樣器是一種高效的多孔吸入式浮游微生物采樣器。該設(shè)備基于Andersen撞擊原理,等效6級,撞擊速度達(dá)20m/s,可高效捕獲≥1μm的微生物顆粒,采樣效率≥95%。采集頭口風(fēng)速與潔凈室內(nèi)風(fēng)速一致,確保微生物濃度檢測的準(zhǔn)確性。采集樣本時,空氣攜帶顆粒高速撞擊在培養(yǎng)皿內(nèi)的培養(yǎng)基表面,培養(yǎng)基為細(xì)菌創(chuàng)造了保持活性的最佳環(huán)境,保證了測定結(jié)果精確可靠。
其核心優(yōu)勢包括:
1,等速采樣設(shè)計:采集口風(fēng)速與潔凈室風(fēng)速一致,確保微生物濃度檢測準(zhǔn)確性;
2,智能功能:3.5寸觸控屏支持采樣量10-6000L、采樣地點代碼等參數(shù)設(shè)置,并通過手機藍(lán)牙遠(yuǎn)程控制;
3,數(shù)據(jù)可追溯性:自動存儲8000條記錄,支持電腦端數(shù)據(jù)導(dǎo)出;
4,自動流量補償:誤差≤2%,避免因培養(yǎng)皿差異導(dǎo)致的數(shù)據(jù)偏差。
采樣準(zhǔn)備工作如下:
1、被測試手術(shù)室(潔凈室)溫、濕度須達(dá)到規(guī)定的要求;靜壓差、換氣次數(shù)、空氣流速必須控制在規(guī)定值內(nèi)。
2、對單向流測試應(yīng)在凈化空調(diào)系統(tǒng)正常運行不少于10min;非單向流不少于30min后開始。
3、靜態(tài)測試時,室內(nèi)人員不多于2人。采樣時測試人員應(yīng)在采樣口下風(fēng)側(cè),并避免遮擋氣流。
4、測試人員應(yīng)按無菌操作規(guī)程進(jìn)行。采樣口、培養(yǎng)皿及操作工具需用75%乙醇擦拭消毒,消毒后空置≥5min。
5、測試人員必須穿戴符合潔凈級別的潔凈服。
6、浮游菌測試前,被測手術(shù)室(潔凈室)已經(jīng)過消毒,且消毒后靜置≥15min。
以上準(zhǔn)備好時,我們使用HKM-IIIB采樣器采樣步驟:
1、在有平臺的潔凈室內(nèi)編制培養(yǎng)皿(XX潔凈室,XX測點),操作前應(yīng)用浸濕75%乙醇的醫(yī)用脫脂棉花擦拭平臺。測試人員雙手用同樣方法嚴(yán)格消毒。在編制過程中再次仔細(xì)檢查培養(yǎng)基平皿的質(zhì)量,有變質(zhì)、破損或污染不能使用。
2、用浸濕75%乙醇的醫(yī)用脫脂棉花擦拭采樣器的采樣口、采樣管、采樣器的頂蓋、轉(zhuǎn)盤及罩子內(nèi)外表面,擦拭后靜置≥1min待乙醇揮發(fā)。
3、采樣器經(jīng)消毒后不放入培養(yǎng)皿,啟動儀器空轉(zhuǎn)運行不少于5min(流量100L/min),使儀器中的殘余消毒劑蒸發(fā),并校準(zhǔn)流量傳感器。
4、根據(jù)手術(shù)室的潔凈度級別設(shè)定采樣量,采樣器的流量(100L/min)X 采樣時間(min)= 采樣量(L)。最小采樣量如下:
? 百級(ISO 5級):≥1000L
? 千級(ISO 6級):≥500L
? 萬級(ISO 7級):≥250L
5、放入培養(yǎng)皿,蓋上蓋子后調(diào)節(jié)采樣器縫隙高度。采樣操作時,培養(yǎng)皿應(yīng)輕拿輕放,用“五指抓拿”培養(yǎng)皿外徑,盡量避免人為對樣本造成污染。
6、采樣點的布置及采樣點數(shù)量:測點位置離地面0.8m~1.5m;送風(fēng)口測點位置離開送風(fēng)口面0.3m左右。最少采樣點數(shù)如下:
● 百級(ISO 5級):≥5點(按房間對角線5點法布置)
● 千級(ISO 6級):≥4點(按房間中心+四角法布置)
● 萬級(ISO 7級):≥3點(按房間中心三角法布置)
7、正式啟動HKM-IIIB采樣器
1、按觸控屏“采樣鍵”或通過手機藍(lán)牙小程序進(jìn)入?yún)?shù)設(shè)置界面,屏幕默認(rèn)顯示最近一次采樣參數(shù)(含采樣量、地點代碼、延遲時間)。
2、按“選擇鍵”切換至目標(biāo)參數(shù)組(支持99組預(yù)存方案),通過上下鍵調(diào)整采樣量(10-6000L)、采樣延遲時間(0-60min)及地點代碼(如“OR-3-1”代表3號手術(shù)室1號點)。
3、確認(rèn)參數(shù)后,按“啟動鍵”開始采樣:
? 采樣延遲倒計時結(jié)束后,儀器自動運行(屏幕實時顯示剩余采樣量及進(jìn)度條);
? 到達(dá)設(shè)定采樣量后,泵機自動停止,數(shù)據(jù)(含時間、地點、溫濕度)存儲至本地(支持8000條)并同步至手機端;
? 若需中途停止,長按“暫停鍵”2秒,數(shù)據(jù)仍自動保存。
8、培養(yǎng)
★ 8.1,將采樣后的培養(yǎng)皿輕放于無菌平臺,倒置放置,用滅菌記號筆標(biāo)注采樣點信息(如“OR-3-1-20231001”)。
★ 8.2,使用高壓滅菌牛皮紙包裹培養(yǎng)皿(單層包裝),裝入專用消毒轉(zhuǎn)運盒,于2-8℃避光保存。
★ 8.3,在生物安全柜內(nèi),雙手經(jīng)75%乙醇消毒后,將培養(yǎng)皿倒置于恒溫培養(yǎng)箱(35℃±1℃)培養(yǎng)48±2小時。
9、菌落計算
9.1 計數(shù)方法:
● 肉眼初判:在自然光下統(tǒng)計菌落數(shù)(直徑≥0.5mm);
● 輔助復(fù)檢:使用環(huán)凱SmartCounter Pro菌落計數(shù)儀(5-10倍放大+AI識別),自動標(biāo)記重疊菌落(如2個菌落重疊仍計為2個);
● 爭議處理:兩名檢測員獨立計數(shù),差異>10%時重新判讀。
9.2 填寫《浮游菌檢測記錄表》(含以下字段):
● 采樣時間、地點、潔凈度等級;
● 采樣量(L)、菌落數(shù)(CFU)、計算濃度(CFU/m3);
● 操作人員簽名及審核人確認(rèn)。
10、結(jié)果計算
浮游菌濃度計算公式:濃度(CFU/m3)= 菌落數(shù)(CFU) / 采樣量(m3)
注:1m3=1000L,若采樣量為1000L,則直接取菌落數(shù)為濃度值(例:菌落數(shù)5 → 5 CFU/m3)。
注意:
1)、每個測點的浮游菌平均濃度必須低于所選的評定標(biāo)準(zhǔn)中關(guān)于細(xì)菌濃度的界限。
2)、若某測點的浮游菌平均濃度超過評定標(biāo)準(zhǔn), 則必須對此區(qū)域先行消毒, 然后重新采樣兩次。再次測試結(jié)果必須合格。