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新冠疫情下環(huán)境微生物的監(jiān)控

發(fā)布時(shí)間：2020-02-28      瀏覽次數(shù)：6775    分享：

新冠疫情下，許多人對環(huán)境中的病毒以及傳播方式忐忑不安，尤其是報(bào)道了空氣氣溶膠對新冠病毒傳播的影響，并且也對環(huán)境和空間消毒后的效果心存疑慮。目前，關(guān)于開展空氣微生物氣溶膠采樣研究較多，根據(jù)不同原理制造的采樣器廣泛用于各領(lǐng)域。如：單級或多級撞擊式采樣器、離心式采樣器、氣旋式采樣器、液體沖擊式采樣器、過濾式采樣器等，在這些類型采樣器中，以安德森空氣微生物采樣器采樣效率最高，所采粒子數(shù)較多。在分級采集不同粒度氣溶膠的時(shí)候，經(jīng)常采用安德森采樣器。早在2010年，中國醫(yī)學(xué)科學(xué)院病原學(xué)研究所就進(jìn)行過用安德森空氣生物采樣器采集病毒氣溶膠的研究。

當(dāng)然，一般情況下，我們要直接對空氣中的病毒進(jìn)行采樣和檢測還相對比較困難，但是，我們通過對空氣中常規(guī)微生物進(jìn)行采樣和檢測，可以反應(yīng)出整體環(huán)境的潔凈度，從而評估我們環(huán)境的整體受污染程度和消毒效果。

1.空氣沉降菌：

通過自然沉降原理收集在空氣中的活微生物粒子，通過專用的培養(yǎng)基，在適宜的生長條件下繁殖到可見的菌落數(shù)。沉降菌的采樣屬于被動式采樣，反映最終落在地面或物體表面的灰塵中攜帶的微生物。

檢測標(biāo)準(zhǔn)：GB/T 18204.3-2013公共場所衛(wèi)生檢驗(yàn)方法 第3部分：空氣微生物

                GB/T 16294-2010 醫(yī)藥工業(yè)潔凈室（區(qū)）沉降菌的測試方法

檢測方法：常用的檢驗(yàn)方法是沉降平板法，即測定在一定時(shí)間內(nèi)從空氣中降落到單位面積地面上的微生物個(gè)數(shù)。

操作步驟：將融化的營養(yǎng)瓊脂培養(yǎng)基或大豆酪蛋白瓊脂培養(yǎng)基（霉菌監(jiān)測用沙氏培養(yǎng)基）倒入90mm無菌培養(yǎng)皿中制成平板（或購買商品化沉降皿），按標(biāo)準(zhǔn)要求布設(shè)在監(jiān)測點(diǎn)上（監(jiān)測點(diǎn)按標(biāo)準(zhǔn)選擇和布局），打開皿蓋暴露在監(jiān)測環(huán)境中5～30min（動態(tài)監(jiān)測不大于4小時(shí)），讓空氣中的微生物降落在平板表面，蓋好皿蓋，然后倒置放入培養(yǎng)箱中，培養(yǎng)48h后計(jì)菌落數(shù)（SDA培養(yǎng)5天）。

沉降皿

環(huán)凱牌三層無菌包裝沉降皿

2.空氣浮游菌

用計(jì)數(shù)濃度法，即通過收集懸游在空氣中的生物性粒子，通過專用的培養(yǎng)基，在適宜的生長條件下繁殖到可見的菌落數(shù)。浮游菌的采樣屬主動采樣，反映潔凈區(qū)內(nèi)空氣中生物粒子的濃度。

檢測標(biāo)準(zhǔn)：《GB/T16293-2010醫(yī)藥工業(yè)潔凈室（區(qū)）浮游菌的測試方法》

檢測方法：常用撞擊式浮游微生物采樣器，使空氣通過狹縫或小孔產(chǎn)生高速氣流，從而將懸浮在空氣中的微生物（浮游菌）采集到專門的平板培養(yǎng)基上，經(jīng)實(shí)驗(yàn)室培養(yǎng)后得到進(jìn)行菌落計(jì)數(shù)。

2.1單級浮游微生物采樣器

基于安德森撞擊原理（撞擊法），采集口風(fēng)速與潔凈室內(nèi)風(fēng)速基本一致的等速采樣理論設(shè)計(jì)，直接采樣，空氣浮游微生物高速通過微孔被撞擊在培養(yǎng)皿內(nèi)的瓊脂表面，撞擊速度20m/s，相當(dāng)于安德森撞擊6級，保證大于1微米的顆粒全被捕獲收集。

采樣步驟：將浮游微生物采樣器放置在監(jiān)測點(diǎn)上，卸下多孔采樣頭和保護(hù)蓋，用75%酒精對多孔采樣頭和保護(hù)蓋、培養(yǎng)皿座及外表進(jìn)行擦拭消毒，然后將預(yù)先制作好裝有TSA或SDA培養(yǎng)基的培養(yǎng)皿（或購買商品化平板）放置于培養(yǎng)皿座上，并將培養(yǎng)皿調(diào)整至水平，裝好多孔采樣頭，設(shè)定采樣參數(shù)，開機(jī)進(jìn)行采樣。采樣結(jié)束后，打開多孔采樣頭，取出培養(yǎng)皿，蓋回原培養(yǎng)皿蓋，貼上標(biāo)簽或?qū)懮暇幪?，置于已到達(dá)設(shè)定溫度的恒溫培養(yǎng)箱內(nèi)，進(jìn)行倒置培養(yǎng)。

浮游微生物采樣器

環(huán)凱牌浮游微生物采樣器

2.2 六級浮游微生物采樣器

整套儀器由六級采樣撞擊器 、采樣控制主機(jī) 、六級采樣撞擊器專用三角架組成。六級采樣撞擊器是由六個(gè)帶有經(jīng)硬質(zhì)氧化的鋁質(zhì)多孔撞擊采樣圓盤組成的 ，多孔撞擊采樣圓盤上可放置已有采樣介質(zhì)的無菌平皿 ，所有多孔撞擊采樣圓盤由三個(gè)彈簧掛鉤把多孔撞擊采樣圓盤緊密地連接在一起。同級多孔撞擊采樣圓盤上環(huán)形排列著400個(gè)孔徑相同的精準(zhǔn)微孔 ，不同級撞擊采樣圓盤的孔徑不同 。當(dāng)含有微生物粒子的空氣進(jìn)入采樣口后 ，采樣主機(jī)氣體采樣流量恒定 ，而氣體通過每一級采樣圓盤不同孔徑的篩孔時(shí) ， 不同大小的微生物粒子按空氣動力學(xué)特性分別以不同的速度撞擊在相應(yīng)的采樣介質(zhì)表面上。第一級-第二級類似人體上呼吸道捕獲的粒子 ，第三級－第六級類似下呼吸道捕獲的粒子 ，這就在相當(dāng)程度上模擬了這些粒子在呼吸道的穿透作用和沉著部位。

采樣步驟：

1) 將六級采樣撞擊器用75％酒精進(jìn)行擦拭滅菌（或置于高壓蒸汽滅菌器121℃滅菌30分鐘），并妥善保管撞擊器備用。

2) 將撞擊器三角架支開并鎖緊，把三角架頂部調(diào)至水平，撞擊器放在三角架的云臺上，主機(jī)放在桌上或地上，用橡膠管連接撞擊器出氣口→主機(jī)進(jìn)氣口。

3) 順序在撞擊器中放入采樣平皿，一手打開平皿蓋，另一手迅速蓋上采樣頭（撞擊盤），然后按住撞擊器上部，掛上三個(gè)彈簧掛鉤。放入和取出采樣平皿時(shí)，必須戴口罩，以防口鼻排出微生物污染平皿。

4) 打開電源開關(guān)，設(shè)定相關(guān)參數(shù)，將撞擊器置于監(jiān)測點(diǎn)，打開撞擊器進(jìn)氣口上蓋，離開采樣點(diǎn)2米之外，即可啟動采樣。

5) 采樣完成后，松開拉鉤彈簧，逐層打開多孔采樣頭（撞擊盤），取出培養(yǎng)皿，蓋回原培養(yǎng)皿蓋，貼上標(biāo)簽或?qū)懮暇幪枺糜谝训竭_(dá)設(shè)定溫度的恒溫培養(yǎng)箱內(nèi)，進(jìn)行倒置培養(yǎng)。

六級浮游微生物采樣器

環(huán)凱牌六級浮游微生物采樣器