黃曲霉毒素檢測方法
發(fā)布時間：2024-12-09 瀏覽次數(shù)：50
黃曲霉毒素在自然界中廣泛存在，對人和動物會產(chǎn)生毒害，具有極強的致癌和致突變作用，在食品生產(chǎn)和農(nóng)作物貯藏過程中比較常見。要想控制食品及農(nóng)作物中黃曲霉毒素的含量，就必須充分了解黃曲霉毒素的結(jié)構(gòu)及其特性。本文現(xiàn)就黃曲霉毒素的檢測方法、去除方法進行總結(jié)。
1、黃曲霉毒素的檢測方法
1.1 薄層層析法
是一種少量、快速、便捷的檢測方法，既可以用于鑒定純凈物，又可以分離混合物，并提純和檢測其含量。其吸附原理主要是利用黃曲霉毒素B1的溶解性，將樣品提取濃縮后在薄層板上分離，于波長356 nm處進行紫外光照射，根據(jù)其薄層上顯示的熒光最低檢出量來測定其含。薄層層析法屬于最傳統(tǒng)的方法，但由于其操作步驟多、樣品前處理繁瑣，誤差非常大，已越來越不適合現(xiàn)代分析的要求。
1.2 高效液相色譜法
高效液相色譜法屬于色譜法的一種，它是利用樣品溶液里的幾種物質(zhì)在流動相和固定相中的分配系數(shù)不同，從而流出色譜柱的順序不同，進而達到了分離的目的。這種方法優(yōu)點在于靈敏度很高、時間較短、適用于多種以及大量樣品的分析，一般在10～25 min之內(nèi)就可以得到檢測結(jié)果，且樣品溶液和色譜柱都可以回收利用；但是此方法所需要的儀器較為先進且昂貴，對技術(shù)的要求較高，故并沒有得到廣泛使用 。
1.3 酶聯(lián)免疫吸附法
酶聯(lián)免疫吸附法是基于抗原與抗體的特異性結(jié)合以及后續(xù)的霉對底物顯色反應(yīng)的高效催化作用，在發(fā)生一系列的生理免疫反應(yīng)后，通過儀器可檢測出被酶催化生成產(chǎn)物的量，進而就可以計算出樣品中的抗體(或抗原)量。酶聯(lián)免疫吸附法是目前國際上認可的一種檢測黃曲霉毒素B1科學(xué)而有效的方法，并且還可以檢測乳制品里的黃曲霉毒素M1。該方法比較便利，檢測成本低廉、特異性強、靈敏度和效率也相對較高，是實驗室主要的檢測方法，也是國家標準的檢測方法之一。
1.4 金標試紙法
是利用疏水膠(又稱膠體金)標記單克隆抗體而設(shè)計的定性或定量檢測方法。測檢樣品溶液里的黃曲霉毒素時，溶液中的黃曲霉毒素B1與試紙上的標記抗體相結(jié)合，使抗體的結(jié)合點被其所占據(jù)，進而抑制了金標抗體與固相表面膜上的黃曲霉毒素B1偶聯(lián)物結(jié)合，使之沒有任何變化；相反，如果樣品溶液中沒有黃曲霉毒素B1，就不能阻止標記抗體與固相表面膜上的黃曲霉毒素B1偶聯(lián)物結(jié)合，從而就會產(chǎn)生顏色較深的色帶，呈紅色。此方法具有快速、方便、靈敏度較高等特點，準確度在85％以上，可以測出樣品中20 ng／g的黃曲霉毒素，一般在5～10 min就可以得到檢測結(jié)果 。
2、黃曲霉毒素的去除
2.1 理化去除法
（1）觀察挑選法。一般分布稻谷中的黃曲霉毒素大部分集中于稻殼層和谷皮、胚層，可以直接挑選出來，然后再進行碾磨加工，可以去除其中的一大部分，但是這種方法比較耗費時間，在工業(yè)生產(chǎn)上很少使用。
（2）吸附法(挑選霉狀，磨粉吸附)。吸附法屬于一種物理方法，就是用多孔性的固體吸附劑將樣品里的雜質(zhì)吸附到其表面，從而使雜質(zhì)與所需要的樣品分離。在日常生活中和實驗室里常見的吸附劑有硅膠、氧化鋁、活性炭和焦炭等，一般活性炭的使用較為廣泛。水合鈉鈣硅酸鋁是最有效的吸附劑，已經(jīng)成功地用于吸附黃曲霉毒素B1。黃曲霉屬于微生物，少量黃曲霉產(chǎn)生的毒素聚集一起呈粉末狀，一般在花生油里常檢測到，由此可利用吸附劑吸除花生油里的大部分毒素，以膨潤土作為吸附劑吸附花生油里的黃曲霉毒素也有明顯的效果。有些黃曲霉毒素吸附劑含有中草藥，這種吸附劑可以同動物飼料一同混合，動物食用后對其肝臟具有保護作用，并能去除其體內(nèi)殘留的黃曲霉毒素，對生長具有促進作用，且具有保健效果。
2.2 生物去除法
（1）乳酸菌黏附法。乳酸菌種類繁多，有的乳酸菌對人體有利，如嗜酸乳桿菌、干酪乳桿菌等，都屬于有益菌，具有改善動物腸道、促進消化和生長、增強自身免疫能力等功效。乳酸菌黏附法是通過乳酸菌自身黏附作用和其所分泌代謝產(chǎn)物的抑菌作用，在腸道內(nèi)與其他厭氧菌共同形成生物學(xué)屏障，通過分泌有機酸和過氧化氫等物質(zhì)抑制病原菌，從而起到保護作用。
（2）其他微生物的去除黃曲霉毒素作用。生物學(xué)方法去毒是利用微生物(如食用菌、綠色木霉等)及其所產(chǎn)生的酶來去除毒素，使毒素降解失活，失去毒性作用。某些微生物可以吸附黃曲霉毒素，與黃曲霉毒素形成復(fù)合體，當微生物形成復(fù)合體后，自身的吸附能力會下降，就比較容易與黃曲霉毒素一起排出體外，從而降低毒素的危害。這種方法不需要用到其他的化學(xué)試劑，沒有污染并且效率較高，是理想的去毒方法。
參考文獻：[1]李昆,姚婷,寧雪雪,等.黃曲霉毒素的研究進展[J].農(nóng)產(chǎn)品加工：下, 2017(6):4.
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