干粉培養(yǎng)基配置及使用時可能出現的問題與分析
發(fā)布時間：2022-06-22 瀏覽次數：2085
1，使用干粉培養(yǎng)基需要注意的問題
1) 干粉培養(yǎng)基及原材料
● 適宜保存在溫度為15 ~ 30°C的陰涼干燥的環(huán)境中
● 應在產品外包裝上標注開封使用的日期
● 使用前應檢查干粉的理化屬性是否正常
2) 玻璃與塑料器皿
● 采用優(yōu)質低堿性的硅酸鹽材料的玻璃器皿
● 避免洗滌劑殘留在器皿的表面
● 滴加酸堿指示劑檢驗器皿上酸或堿的殘留，如滴加幾滴溴甲酚紫，酸性則指示劑呈黃色，堿性則指示劑呈藍色
● 棄去有蝕刻劃痕或破裂的器皿
3) 儀器設備
● 定期對實驗室儀器設備進行校準，如天平、pH計、高壓滅菌鍋、水浴鍋等
4) 水
● 使用蒸餾水或去離子水
5) 溶解培養(yǎng)基
● 按照標簽上的說明準確稱量培養(yǎng)基
● 加入適量的蒸餾水或去離子水加熱至完全溶解，溶解過程中不斷攪動培養(yǎng)基溶液，避免局部過熱
6) 高壓滅菌
● 按照標簽上的說明設定一定的溫度和時間高壓滅菌
● 超過規(guī)定的滅菌時間或溫度，可能造成培養(yǎng)基中營養(yǎng)成分或某些抑制劑的破壞
7) 附加試劑
● 產品需要單獨添加的試劑(抑菌劑、血、血清等)必須是在培養(yǎng)基滅菌后冷卻至50C左右時加入
● 加入附加試劑后，需充分混勻
8) 培養(yǎng)基滅菌后分裝
● 分裝前使培養(yǎng)基冷卻至50C左右，并搖勻培養(yǎng)基
● 在超凈臺或超凈間迅速分裝。若鋪平板，分裝培養(yǎng)基后，掀蓋敞開- -小口，使培養(yǎng)基表面干燥
9) 保存
● 一般來說，對于配制好的培養(yǎng)基，密封包裝后放置2~ 8C冰箱中可保存1~2周
2、干粉培養(yǎng)基配制中的常見問題及原因
1) pH改變
● 配制培養(yǎng)基使用的水不符合要求
● 配置過程中培養(yǎng)基溫度過高，超過標簽上規(guī)定的滅菌溫度或時間
● 沒有加熱充分溶解
● 反復復溶
● 保存條件不當
● 器皿上有殘留的化學試劑
● 未在培養(yǎng)基冷卻時測定pH
2) 出現沉淀、渾濁
● 配制培養(yǎng)基使用的水不符合要求
● 沒有充分加熱溶解
3) 顏色變深
● 局部加熱過度出現焦化
● 反復復溶
4) 凝膠強度下降
● 加入水的量不準確
● 培養(yǎng)基中的瓊脂沒有完全溶解
● 培養(yǎng)基的pH值不正常
● 反復復溶
5) 菌生長差或者菌落不典型
● 加熱滅菌時間過長
● 反復復溶
● 未充分混勻培養(yǎng)基
● 添加抗生素等試劑的量不準確
● 染菌
