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HKE381 LwaCas13a Nuclease(Cas13a 核酸酶)

英文名稱:LwaCas13a Nuclease

貨 號(hào) :HKE381

規(guī) 格 :200pmol

用途:特異性地切割靶標(biāo) RNA

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產(chǎn)品名稱:LwaCas13a Nuclease
中文名稱:LwaCas13a 核酸酶

產(chǎn)品編號(hào)與包裝規(guī)格:

編號(hào)產(chǎn)品名稱規(guī)格產(chǎn)品介紹價(jià)格
HKE381LwaCas13a Nuclease200pmolcrispr基因編輯(Cas13 核酸酶)2745

產(chǎn)品描述:
      Cas13a 核酸酶(又名 C2c2)是 VI 型 CRISPR-Cas 系統(tǒng)效應(yīng)蛋白,具有 RNA 介導(dǎo)的 RNA 內(nèi)切酶活性。在靶標(biāo)單鏈RNA 存在 PFS 序列的情況下,可特異性地切割靶標(biāo) RNA。此外,Cas13a 還具有依賴于靶標(biāo)單鏈 RNA 的反式切割活性(即旁路切割活性),可用于開(kāi)發(fā)靶標(biāo)核酸的快速檢測(cè)試劑盒。
      本公司開(kāi)發(fā)的 Cas13a Nuclease 源自 Leptotrichia wadei(Lwa) 細(xì)菌,采用大腸桿菌重組表達(dá),純度超過(guò) 95%,既可以用于體外 RNA 切割,體外 RNA 檢測(cè),也可用于活細(xì)胞 RNA 的調(diào)控、RNA 基因編輯,同時(shí)也可以用于光學(xué)探針生物學(xué)標(biāo)記。Cas13a 在體外與 crRNA 穩(wěn)定結(jié)合,將 Cas13a/crRNA(或者 crRNA 質(zhì)粒)轉(zhuǎn)入細(xì)胞,實(shí)現(xiàn)細(xì)胞內(nèi) RNA 的編輯,Cas13a/crRNA 也可以被靶RNA 激活,從而實(shí)現(xiàn)體外高靈敏度的 RNA 檢測(cè)。

使用建議:
      1) 建議全程在冰上配制體系。
      2) 為了保證反應(yīng)的正常進(jìn)行,需使用高質(zhì)量的 RNA 模板。
      3) 使用 RNase Free 的耗材(離心管、槍頭等)。

產(chǎn)品說(shuō)明:

LwaCas13a Nuclease使用說(shuō)明

保存溫度:-80℃保存。

LwaCas13a Nuclease 產(chǎn)品包裝(A包裝):

產(chǎn)品組成體積
LwaCas13a Nuclease(5pmol/μl)40 μl
10×Cas13a Reaction Buffer1 mL

保存體系:500mM NaCl,20mM sodium acetate,0.1mM EDTA,1mM TCEP,50% (v/v) Glycerol,pH6.0,at 25℃。

質(zhì)量保證:經(jīng)多次柱純化,SDS-PAGE 膠檢測(cè)僅可見(jiàn)清晰單一的目的條帶,純度達(dá) 95%;內(nèi)毒素含量<100EU/mg;qPCR 方法檢測(cè)無(wú)大腸桿菌基因組殘留;無(wú) RNase、核酸內(nèi)、外切酶污染。

切割體系(20μL):(在冰水浴上混合以下體系:)

10×Cas13a Reaction Buffer2 μl
靶標(biāo) ssRNA(500nM)1 μl
crRNA(500nM)2-8 μl
ssRNA reporter (FAM-BHQ1)(10μM)0.5 μl
LwaCas13a Nuclease 1-6pmol RNase Free WaterTo 20 μl

37 ℃每 30-60s 收集一次熒光,80-99cycles。