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細菌新型生化鑒定管使用說明
―― 071840 綠膿桿菌生化鑒定盒（5種×10次）
一）生化管的使用方法
開啟西林瓶前，用75%酒精棉消毒西林瓶表面，在無菌條件下，按鋁蓋上的箭頭方向打開鋁蓋，撕開鋁蓋，打開西林瓶膠塞（如圖1）所有的西林瓶在使用后均高壓滅菌后方可棄去。
二）綠膿桿菌生化鑒定盒的詳細使用方法
綠膿桿菌為革蘭氏陰性桿菌，氧化酶陽性，能產(chǎn)生綠膿菌素、液化明膠，還原硝酸鹽和在42℃條件下生長的一類致病菌。
從分離培養(yǎng)平板上挑取可疑菌苔接種于每種微量西林瓶內(nèi)。將已接種的西林瓶再套上膠塞，一般采用全加塞（如圖2左兩瓶所示），特殊情況在下表注明采用半加塞（如圖2右兩瓶所示），直立于內(nèi)托的凹槽內(nèi)（如圖2），或放置于合適的瓶架中，于35－37℃培養(yǎng)箱中培養(yǎng)，結(jié)果觀察見表1。
注意事項：
1、如有特殊的接種方式、培養(yǎng)時間或培養(yǎng)方式，請詳見每種生化鑒定管附帶的使用說明。
2、明膠的凝固點在28℃左右，受運輸過程的溫度及震蕩影響，含明膠的產(chǎn)品（明膠）有可能出現(xiàn)培養(yǎng)基在管壁凝固形成不規(guī)則狀，此為正?，F(xiàn)象，并非質(zhì)量問題，使用前可用水浴或培養(yǎng)箱或其他方法溫育，使培養(yǎng)基呈液體流動狀，擺直立即可。
| 表1各項生化管使用說明 | ||||
| 產(chǎn)品名稱 | 結(jié)果判定 | 培養(yǎng)時間 (小時) | 使用說明 | |
| 陽性 | 陰性 | |||
| 綠膿色素 | 產(chǎn)生色素 | 不產(chǎn)生色素 | 22-26 | 西林瓶半加塞（如圖2右兩瓶所示）培養(yǎng)后加入氯仿約15~20滴，充分振蕩，陽性者氯仿提取液呈藍色，再加入1mol/L鹽酸6~10滴，振蕩后靜置片刻，如上層鹽酸液呈粉紅色或紫紅色即為陽性，表示有綠膿色素存在。 |
| 明膠 | 4-8℃呈液態(tài) | 4-8℃呈固態(tài) | 24-72 | 挑取新鮮菌苔穿刺接種，西林瓶半加塞（如圖2右兩瓶所示）后豎立培育，培養(yǎng)后置4-8℃冰箱30分鐘后觀察結(jié)果。如果24h不液化，則繼續(xù)培養(yǎng)到48h或72h再觀察。 |
| 硝酸鹽產(chǎn)氣 | 倒管內(nèi)有氣泡 | 倒管內(nèi)無氣泡 | 18－24 | 使用前確定倒管內(nèi)無氣泡。 |
| 營養(yǎng)瓊脂 | 生長 | 不生長 | 41～42℃，24～48 | 用接種針挑取新鮮菌苔，在斜面上劃“之”字形接種。 |
| 氧化酶試劑 | 藍紫色 | 不變色 | 30秒內(nèi) | 滴加1滴試劑到一小塊潔凈濾紙上，以剛剛浸濕為宜；用玻棒或接種環(huán)（鉑或塑料）挑取適量新鮮菌苔涂在紙片上。 |
| 備注：本鑒定盒是按照環(huán)凱產(chǎn)品目錄中的品種成份從左到右的順序擺放。 | ||||
三）綠膿桿菌的生化鑒定程序（見下圖）和生化鑒定特征（見表2）
