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副溶血性弧菌細(xì)菌生化鑒定盒(SN標(biāo)準(zhǔn))

英文名稱:

貨 號 :071771

規(guī) 格 :18種×5次/盒

用途:常規(guī)鑒定溶血性弧菌15項生化反應(yīng)(參考“中華人民共和國進(jìn)出口商品檢驗行業(yè)標(biāo)準(zhǔn)SN/T0173-201

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說明書
微生物圖冊
行業(yè)應(yīng)用
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  副溶血性弧菌細(xì)菌生化鑒定盒(18種×5次)(SN/T 0173-2010)

  一)整套試劑及用品

  鑒定生化反應(yīng)的24種試劑(表1)、5瓶0.85%無菌生理鹽水、1瓶0.5 McFarland的濁度管、5支一次性吸管。

  二)西林瓶的使用方法

  開啟西林瓶前,用75%酒精棉消毒西林瓶表面,在無菌條件下,按鋁蓋上的箭頭方向打開鋁蓋,撕開鋁蓋,打開西林瓶膠塞(如圖1)。所有的西林瓶在使用后均高壓滅菌后方可棄去。

  三)副溶血性弧菌生化鑒定盒的詳細(xì)使用方法

  注意:如有特殊的接種方式、培養(yǎng)時間、溫度或培養(yǎng)方式,請詳見每種生化鑒定管附帶的使用說明。

    副溶血性弧菌為革蘭氏陰性無芽胞桿菌,易呈多形態(tài),有棒狀、弧狀、卵圓狀、球狀、絲狀等,排列不規(guī)則,一般大小為0.3~0.7μm×1~2μm,單端一根鞭毛,有動力,運動活潑,兩端濃染,在固體培養(yǎng)條件下能生長周鞭毛。菌落常為隆起,圓形,稍渾濁不透明,表面光滑,濕潤,不產(chǎn)生色素。

    挑取平板分離的可疑菌落劃線接種3%NaCl胰蛋白胨大豆瓊脂平板35-37℃培養(yǎng)18-24h,革蘭氏染色鏡檢,并將新鮮菌苔置于已配備的無菌生理鹽水中,與0.5 McFarland的濁度管比濁,將菌懸液制備成0.5McFarland ( 約108cfu/mL ),用吸管吸取2滴(約0.06mL)菌懸液加入每種微量生化管內(nèi)。將已接種的西林瓶再套上膠塞,一般采用全加塞(如圖2左兩瓶所示),特殊情況在下表注明采用半加塞(如圖2右兩瓶所示),直立于內(nèi)托的凹槽內(nèi)(如圖2),或放置于合適的瓶架中,于35-37℃培養(yǎng)箱中培養(yǎng),結(jié)果觀察見表1。

 

    注意:如有特殊的接種方式、培養(yǎng)時間、溫度或培養(yǎng)方式,請詳見每種生化鑒定管附帶的使用說明。

1

產(chǎn)品名稱

結(jié)果判定

結(jié)果觀察

溫度、時間(小時)

使用說明

陽性

陰性

氧化酶試劑

藍(lán)紫色

不變色

30 

滴加1滴試劑到一小塊潔凈濾紙上,以剛剛浸濕為宜;用玻棒或接種環(huán)(鉑或塑料)挑取適量新鮮菌苔涂在紙片上。

1%NaCl三糖鐵瓊脂

產(chǎn)氣有氣泡,

產(chǎn)酸變黃色,

產(chǎn)硫化氫變黑色,

有動力擴散生長

無氣泡,

不變色

無擴散生長

3537、24

用接種針挑取新鮮菌苔穿刺,穿刺完畢后在斜面上劃字形接種,豎立培育。西林瓶半加塞(如圖2右兩瓶所示)后豎立培育。

無鹽胨水、3NaCl胨水、6NaCl胨水、8NaCl胨水、10NaCl胨水

生長

不生長

3537、24

 

3%NaCl蔗糖

黃色

紫色

3537、824

 

1%NaCl賴氨酸脫羧酶

1%NaCl鳥氨酸脫羧酶

 

試驗管藍(lán)綠色,

對照管變黃

試驗管與對照管均變黃

3537、1824

每株被檢菌應(yīng)同時接種氨基酸對照管一支,并加滅菌液體石蠟34滴覆蓋培養(yǎng)基表面。培養(yǎng)1824小時,未見陽性結(jié)果,繼續(xù)培養(yǎng)4天,再做最終結(jié)果判定。

1%NaCl精氨酸雙水解酶

試驗管藍(lán)綠色,

   對照管變黃

試驗管與對照

管均變黃色

353724—48

同上,同時接種氨基酸對照管一支,并加滅菌液體石蠟34滴覆蓋培養(yǎng)基表面。試驗管變藍(lán)綠色,對照管變黃為陽性,兩管均為黃色為陰性,作假單胞菌屬鑒定時不需覆蓋液體石蠟。

β-半乳糖苷(ONPG

深黃色

淡黃色或無色

35371224

 

3%胰蛋白胨大豆瓊脂斜面(42生長)

生長

不生長

42、24

 

OF( Hugh-leifson)

 

 

3537、24—48

被檢菌同時接種兩支生化管,其中一支加滅菌液體石蠟5-8滴覆蓋表面。兩支管均為黃色判斷為發(fā)酵型細(xì)菌;加石蠟管不變黃,而未加石蠟管變黃為氧化型細(xì)菌;兩支管均不變黃為產(chǎn)堿型細(xì)菌。

V-P 半固體

動力:擴散生長,VP:滴加VP試劑后變紅色

動力:無擴散生長,

VP:滴加VP試劑后變紅色

3537、24—48

用接種針挑取新鮮菌苔穿刺接種,豎立培育。

培養(yǎng)后依次加入8VP試劑甲液及4滴乙液,混勻,再培養(yǎng)1020分鐘觀察結(jié)果。

1%NaCl蛋白胨水

紅色

不變色

3537、24—48

西林瓶西林瓶半加塞(如圖2右兩瓶所示)培養(yǎng)后加靛基質(zhì)試劑2-3滴,立即觀察結(jié)果。

備注:本鑒定盒是按照環(huán)凱產(chǎn)品目錄中的品種成份從左到右的順序擺放。

 

四)副溶血性弧菌的生化特性見表

2   副溶血性弧菌的生化性狀

試驗項目

結(jié)果

革蘭氏染色鏡檢

陰性,無芽胞,呈棒狀、弧狀、卵圓狀

氧化酶

+

3%NaCl三糖鐵瓊脂

底層變黃不變黑,不產(chǎn)氣,斜面不變色或紅色加深,穿刺接種處擴散生長

無鹽胨水

-微弱生長

3% NaCl胨水

+

6% NaCl胨水

+

8% NaCl胨水

+

10NaCl胨水

-或微弱生長

3%NaCl蔗糖

+

靛基質(zhì)

+

3%NaCl賴氨酸脫羧酶

+

3%NaCl賴氨酸脫羧酶

+

3%NaCl精氨酸雙水解酶

V-P

動力

+

β-半乳糖苷(ONPG

42生長

+

OF ( Hugh-leifson)

不分解